Jako samodzielny zespół, Chór Nowodworski istnieje od 1986 roku. Początkowo prowadzony był przez Zbigniewa Toffla. Obecnie przewodniczy mu Ryszard Źróbek, który przejął kierownictwo w listopadzie 1992. Chór prowadzi aktywną działalność, dając rocznie ok. 30 koncertów. Prawie 100 uczniów i uczennic należących do chóru bierze czynny udział w życiu szkoły, koncertuje na terenie Krakowa, a także reprezentuje kulturę polską poza granicami kraju. W repertuarze chóru znajduje się muzyka z różnych epok, różnych stylów muzycznych: utwory sakralne, pieśni patriotyczne, ludowe, gospel oraz muzyka popularna. Młodzi chórzyści zapraszani są do uświetniania różnych uroczystości na terenie miasta. Coroczny czerwcowy koncert jest podsumowaniem roku szkoleniowego i prezentacją aktualnych propozycji repertuarowych.

Chór pod przewodnictwem Ryszarda Źróbka miał zaszczyt wystąpić podczas uroczystości nadania honorowego obywatelstwa Stołecznego Królewskiego Miasta Krakowa Wisławie Szymborskiej, Stanisławowi Lemowi oraz Normanowi Daviesowi, a także podczas wręczenia medalu Cracoviae Merenti w Urzędzie Miasta Krakowa. Regularnie występuje na uroczystościach organizowanych przez Towarzystwo Opieki nad Majdankiem, Związek Więźniów Okresu Stalinowskiego oraz Rodziny Katyńskie. Chór wystąpił też podczas uroczystości organizowanych przez Muzeum Armii Krajowej oraz Państwowe Muzeum Auschwitz-Birkenau.

W 1994 r. 120-osobowy Chór I LO wystąpił na koncercie w ramach obchodów 1200-lecia Frankfurtu n/Menem. Koncert odbył się w jednej z najważniejszych sal Koncertowych Europy - Alte Oper, a chórzyści oprócz utworów a capella zaprezentowali utwory Haendla, Moniuszki, Hoffmana wraz z orkiestrą Gimnazjum Karl-Schurz Schule z Frankfurtu. Po raz drugi Chór Nowodworski wystąpił w Alte Oper w 2001 podczas obchodów 100-lecia Karl-Schurz Schule. W grudniu 2005 Chór wystąpił po raz trzeci przed publicznością we Frankfurcie, śpiewając polskie kolędy podczas bożonarodzeniowego koncertu na zaproszenie Towarzystwa Przyjaciół Kraków-Frankfurt nad Menem. We wrześniu przebywał na koncertach w Feltre k/Wenecji we Włoszech.

W 1999 Chór Nowodworski odbył swą najdalszą jak dotąd podróż, udając się do Japonii. Wystąpił tam na festiwalu "August in Hiroshima" wspólnie ze Stevie Wonderem. Koncert transmitowany był przez satelitę do wielu krajów świata. Zorganizowały go miasto Hiroszima, UNESCO oraz telewizja HNK; na żywo wysłuchało go ponad 4000 osób. Od tamtej pory utrzymywane są kontakty Chóru Nowodworskiego ze środowiskiem kulturalnym Japonii, ostatnia wizyta chóru japońskiego w I LO odbyła się w II 2006.

Od 1996 chór prowadzi partnerską współpracę z Detmolter Jugendorchster z Detmold w Niemczech. Owocem tej współpracy były koncerty w Detmold w latach 1997, 1999, 2001 oraz 2003, koncerty w Krakowie: w kościele św. Piotra i Pawła w 1996 oraz w Filharmonii im. K. Szymanowskiego w 1998, 2000 i 2002 r.

W 2007 r. w Filharmonii Krakowskiej odbył się koncert Chóru Nowodworskiego oraz Germantown Academy Singing Patriots, chóru z najstarszej szkoły w USA, mieszczącej się w Filadelfii. Amerykański Chór przebywał w Polsce na koncertach, wystąpił też w podwarszawskim pałacu w Wilanowie oraz Bazylice Mariackiej w Krakowie. Ich celem było koncertowanie z najlepszymi polskimi chórami szkolnymi.

I LO gościło też chór Penn State University z Pensylwanii, chóry z Austrii, Finlandii, Niemiec, Anglii oraz Włoch.

Od 1996 r. Chór Nowodworski występuje regularnie na Małopolskim Konkursie Chórów a capella. Wydał też kilka płyt: CD i DVD, będących efektem etapu pracy.